UniquePOKE 纳米针转染试剂盒 使用说明书

产品描述

Unique POKETM纳米针转染试剂盒利用先进的专利纳米技术，可将核酸分子递送至各种哺乳动物悬浮细胞中。

包装内容物

表 1：Unique POKE^TM试剂盒组分

适用范围

适用于常规各种哺乳动物悬浮细胞。

注意事项

本产品仅供科学研究使用，不得用于临床医学及其他非合理用途。

实验流程

1、接种细胞，转染时细胞生长密度为5x10⁵-4x10⁶/ ml, 确保细胞处于对数生长期。

2、分别取50 μl 试剂B于两个0.5 ml 离心管中，一管加入0.25 μg DNA, 一管加入0.5 μl（或0.75 μl）试剂A，吹打均匀后将两管中的溶液混合，静置10-15分钟。

3、将悬浮细胞连同培养液加入15 ml 离心管中，300-500 g 离心5分钟。弃上清，用试剂 B 重悬细胞并吹打均匀，将细胞密度调整为4×10⁶个/ml （纳米针有效面积为0.44 cm²，根据细胞大小调整细胞密度，确保细胞能够单层平铺在纳米针芯片上，

单个转染平皿内细胞量 =

4、将转染平皿顶盖打开，取 Rinse Buffer 200 μl 置于转染平皿内盖凹槽中，润洗30秒后将溶液取出，重复润洗两次后晾干备用。

注意：避免移液枪头接触到纳米针芯片。

5、将100 μl 细胞悬液与步骤2得到的溶液混合均匀，并加?到转染平皿内盖凹槽中，盖上顶盖并拧紧。

注意：细胞悬液加入到转染平皿之后，不要随意晃动或翻转。

6、将密封好的转染平皿放入离心机，300 g 离心5分钟（离心机加速设为6，降速设为3，难转细胞可适当增大转速至500 g）。

7、离心结束后，转染平皿置于37℃培养箱静置5-10 min后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，收集细胞悬液于细胞培养皿中，置于培养箱中孵育。

8、1小时后，加入300 μl 细胞培养液继续培养至第二天进行分析。

表 2：Unique POKE^TM试剂盒建议组分用量

操作流程图