IF=10.5 |BioTNT助力生物医疗研究：水稻特异性miR1850.1靶向NPR3调控冷胁迫反应

2025年6月，作物逆境分子生物学实验室、黑龙江省现代农业栽培与作物种质改良重点实验室共同在国际期刊《Plant Communications》上发表的，题为“Rice-specific miR1850.1 targets NPR3 to regulate cold stress response”的论文。杨申，蔡晓曦，李万红，吴昊，何子田，孟强瑞，贾博为等为第一作者。孙明哲，孙晓丽为通讯作者。

摘要

本研究揭示了一种水稻特异性miRNA——miR1850.1通过靶向免疫基因NPR3调控冷胁迫响应的分子机制。研究发现，冷胁迫抑制pri-miR1850及其成熟产物miR1850.1的表达，从而解除其对NPR3的转录切割和翻译抑制，导致NPR3转录本和蛋白水平显著上调。遗传学实验表明，过表达pri-miR1850或miR1850.1会降低水稻幼苗和孕穗期的耐冷性，而敲除pri-miR1850或抑制miR1850.1则增强耐冷性。此外，miR1850.1-NPR3模块还影响水稻的抗病性和产量。该研究为耐冷水稻品种的分子设计提供了新靶点。

翻译：如前所述，将指示的构建体转化为水稻原生质体（Sadasivam 和 Gallie，1994 年）。在28C下孵育12小时后，使用植物RIPA裂解缓冲液（Beyotime，P0045，中国）从一半的转化原生质体中提取总蛋白，并用抗FLAG单克隆抗体（BioTNT，BRLI-01，中国）或植物肌动蛋白单克隆抗体（Abkkine，ABM40122，中国）进行免疫印迹，然后用High-Sig ECL蛋白质印迹底物（Tanon，180-501，中国）检测。剩余的原生质体用于RNA提取和RT-PCR。BlpR基因用于显示质粒转化的效率，使用肌动蛋白基因用于显示等量的检测到的原生质体。使用肌动蛋白作为内源性对照计算NPR3的相对转录本和蛋白质水平。使用两个独立的转基因系，并进行了 3 次重复。

BioTNT产品：

现货号：L-MAb03，Anti-DYKDDDDK鼠单克隆抗体是高纯度的小鼠单克隆抗体，属IgG2b，免疫原为人工合成的Flag标签多肽序列（DYKDDDDK）。该抗体能高度特异性识别融合蛋白N端、C端的DYKDDDDK标签，广泛用于融合蛋白的纯化、检测和鉴定。

总结

本研究阐明了水稻特异性miR1850.1-NPR3模块在冷胁迫响应中的核心作用。冷胁迫通过抑制pri-miR1850表达，解除miR1850.1对NPR3的转录和翻译抑制，从而激活NPR3介导的耐冷通路。遗传证据表明，miR1850.1通过负调控NPR3降低水稻幼苗和生殖期的耐冷性，而NPR3过表达可增强抗氧化防御。该模块还参与抗病与产量的平衡，为“生长-防御权衡”提供了新案例。研究成果不仅拓展了非编码RNA在非生物胁迫中的调控网络，也为培育耐冷高产水稻品种提供了分子靶点。未来需进一步解析冷信号如何调控pri-miR1850转录及NPR3下游通路。