IF=4.1 BioTNT助力生物医疗研究：STK11 通过磷酸化 AMPK 激活 A549 细胞模型中的自噬，减轻急性肺损伤期间的肺部炎症
2025年12月，南昌大学江西医学院附属口腔医院麻醉与手术科，江西省口腔疾病重点实验室，江西省口腔疾病临床研究中心、南昌大学江西医学院第一附属医院麻醉与手术科在国际期刊《Journal of Inflammation Research》上发表的，题为“STK11 Alleviates Pulmonary Inflammation During Acute Lung Injury by Phosphorylating AMPK to Activate Autophagy in A549 Cell Model.”的论文。肖荣、齐志敏、陈婷为第一作者，魏福生为通讯作者。
摘要：
目的：探究蛋白STK11是否能减轻脂多糖诱导的急性肺损伤，假设其通过AMPK的“启动信号”激活自噬（有害物质清除）。
方法：研究者采用基因组学优先策略，整合了GSE66890、GSE10474和GSE32707数据集，通过生物信息学方法筛选急性肺损伤中自噬相关的差异表达基因，并通过蛋白-蛋白相互作用分析确认STK11为关键调控因子。他们使用50 μg/mL脂多糖处理人肺细胞24小时以建立急性肺损伤模型，随后在细胞中过表达或沉默STK11，评估了细胞功能、凋亡、炎症因子、自噬活性及AMPK活化情况。
结果：研究者验证了STK11是急性肺损伤中自噬的关键调控因子。STK11过表达显著改善了细胞功能，减少了凋亡（促凋亡蛋白降低/抗凋亡蛋白升高），降低了IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA及蛋白水平，增强了自噬（LC3B-II升高、P62降低、自噬小体增多），并活化了AMPK。而沉默STK11则逆转了这些保护效应，并抑制了AMPK。
结论：STK11通过激活AMPK介导的自噬减轻脂多糖诱导的肺细胞损伤，成为急性肺损伤的潜在治疗靶点。
BioTNT相关：
使用 BioTNT（中国）的 TRIzol 试剂，按照制造商说明书从 A549 细胞中提取总 RNA。取 1 微克 RNA 进行逆转录合成 cDNA，作为定量实时 PCR 模板。使用 SYBRGreen 预混液试剂盒（Roche），按照制造商说明书检测 IL-6、IL-8 和 TNF-α 的 mRNA 水平，并以 β-actin 作为内参进行标准化。实时 PCR 扩增程序如下：初始变性 95°C 30 秒；40 个循环：95°C 变性 3 秒，60°C 退火 30 秒，72°C 延伸 10 秒；一个循环：95°C 15 秒，65°C 1 分钟；最后冷却步骤：40°C 30 秒。mRNA 表达水平采用 2^-ΔΔCt 方法计算。用于扩增的引物序列如下所示：
TNF-α：Forward: TGACTTGTTCCTCAGCCTCTT;
Reverse: TGAGGTACAGGCCCTCTGAT.
IL- 6：Forward: TGCGTCGTAGTTTCTCTTCTTCT;
Reverse: GGAATCTTCTCCTGGGGGTA.
β-actin：Forward: TGGCACCCAGCACAATGAAGATCA;
Reverse: CTGCTTGCTGATCCACATCTGCT.