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IF=4.6 | BioTNT助力生物医疗研究:批量与单细胞测序分析揭示氧化应激相关基因TPPP3与VEGFA在慢性阻塞性肺疾病中的作用

 

IF=4.6 | BioTNT助力生物医疗研究:批量与单细胞测序分析揭示氧化应激相关基因TPPP3VEGFA在慢性阻塞性肺疾病中的作用

20262月,复旦大学附属华山医院中西医结合科、复旦大学中西医结合研究院在国际期刊《Scientific Reports》上发表的,题为“Oxidative stress-associated genes TPPP3 and VEGFA in COPD revealed by bulk and single-cell sequencing analysis”的论文。蔡永林、吴越人、陈文静、石雨婷、罗伟航、吴心远、阮振辉为第一作者,董竞成为通讯作者。

摘要

慢性阻塞性肺疾病(COPD)以慢性气道炎症为特征,且与氧化应激密切相关。本研究旨在通过整合生物信息学与实验方法,识别并验证COPD中关键的氧化应激相关基因及通路。从基因表达综合数据库(GEO)获取COPD公共数据集,从GeneCards数据库获取氧化应激相关基因。筛选差异表达基因(DEGs)并进行功能富集分析。采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归与随机森林等机器学习算法筛选核心基因,并通过计算受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评估其诊断价值。分析单细胞RNA测序(scRNA-seq)数据以明确核心基因在不同细胞类型中的分布特征。最后,利用人支气管上皮细胞(BEAS-2B)构建COPD联合氧化应激细胞模型,并对关键基因的表达进行实验验证。我们识别出76COPD与氧化应激的共同重叠基因,这些基因主要富集于坏死性凋亡、JAK-STATMAPK及相关通路。通过机器学习方法筛选出12个核心基因。单细胞分析显示,TPPP3VEGFA主要在上皮细胞中表达。实验验证在基因水平上证实了生物信息学预测结果。本研究识别并验证了COPD12个氧化应激相关的核心基因,其中TPPP3VEGFA被确定为富集于上皮细胞的关键基因,可能参与组织重塑。这些发现不仅为探索新的治疗策略提供了思路,也可能作为COPD潜在的诊断生物标志物或候选治疗靶点。

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炎症因子及其他氧化应激相关因子的检测
采用商品化酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)(南京建成生物工程研究所,中国南京)以及白细胞介素-1βIL-1β)、白细胞介素-6IL-6)、白细胞介素-8IL-8)、肿瘤坏死因子TNF-α)(BioTNT,中国上海)的水平。

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