一、产品介绍：

BioTNT qPCR Array专为检测不同组织或细胞中特定基因的表达量而设计，这些基因按照预制或定制要求成套设置。检测结果所显示的表达差异可帮助研究者鉴定或验证这些基因的生物学意义，以及与其研究的重要相关性。

对于目录(预制)产品，每块384孔板包含84对PCR引物，可以进行4个样本单孔或者两个样本双复的实验。这些引物全部经过预先验证，并包被于指定的板孔中。在同一块96孔板上，有12个(384孔板有48个)反应孔包被了不同类型的对照，用以检测从反转录到qPCR整个过程的反应效率。

逆转录试剂和以荧光染料SYBR®Green 为基础的定量检测试剂作为被推荐的RT-qPCR试剂产品可与qPCR Array配套使用。该系列试剂均经过优化，具有高的灵敏度、效率和特异性。其他公司的类似试剂可能适用，但未验证过，不推荐使用。

二、产品优势

灵敏度高，样本使用量低

线性范围广，可同时检测表达水平差异大的基因

每个基因的检测引物优化后保证高扩增率和产物单一

重复性高，Ct值的平均差异只有0.25个循环

覆盖范围广：目录产品包含通路分析、疾病研究

定制产品可根据客户要求选择设置

数据分析方便：专用软件方便数据统计与分析

三．运输和储存条件：

-20℃储存

四．适用仪器：

plate format	Instrument provider	QPCR instrument model
384well	lifetechnologies	7900，ViiA7(384 well block)
96 well	lifetechnologies	7300,7500,7700,7900（standard 96well），ViiA7（standard 96well）
96 well	lifetechnologies	7500(fast block)，7900HT（fast block），stepone plus，ViiA 7(Fast block)
96 well	Biorad	iCycler，MyiQ, iQ5
96 well	Biorad	CFX96，DNA Engine opticon，opticon 2，Chromo4

五．质量标准（QC）

1. biotnt gene qPCR array中检测的基因引物，经实验验证结果分析，融解曲线均呈单一锐锋，电泳条带均呈单一条带，说明这些引物均是特异扩增引物，验证合格。

2. PTC（阳性对照）反应孔，从融解曲线上分析均呈单一锐锋，从扩增曲线上分析，CT值介于18～22之间。

3. RTC（spike-in反转录对照）反应孔，从融解曲线上分析均呈单一锐锋，从扩增曲线上分析，CT值介于17～23之间。

4. HGDC 的CT 值应大于35，说明样本中没有基因组污染。

5. RTC和 PTC的三重复CT 值应比较接近，说明实验重复性好。

6. 板与板之间（批内）重复性达0.99以上，具有高度重复性。

六．基因（引物）排布：

每一个样本区里的基因排列如下：

基因1

基因2

基因3

基因4

基因5

基因6

基因7

基因8

基因9

基因10

基因11

基因12

基因13

基因14

基因15

基因16

基因17

基因18

基因19

基因20

基因21

基因22

基因23

基因24

基因25

基因26

基因27

基因28

基因29

基因30

基因31

基因32

基因33

基因34

基因35

基因36

基因37

基因38

基因39

基因40

基因41

基因42

基因43

基因44

基因45

基因46

基因47

基因48

基因49

基因50

基因51

基因52

基因53

基因54

基因55

基因56

基因57

基因58

基因59

基因60

基因61

基因62

基因63

基因64

基因65

基因66

基因67

基因68

基因69

基因70

基因71

基因72

基因73

基因74

基因75

基因76

基因77

基因78

基因79

基因80

基因81

基因82

基因83

基因84

HK1

HK2

HK3

HGDC

RTC

PTC

& 基因引物：84个反应孔（从A排到G排）已预先交联好特异基因引物（详见基因引物列表）。

& HK1-3：3条已交联的管家基因(内参)引物，可作为array数据标准化过程中样品的阳性对照。

&HGDC：基因组DNA对照，可用于qPCR反应体系中是否有基因组DNA污染。

& RTC：spike-in反转录对照，可用于检测RT反应的效率。这些已交联的引物可特异性扩增样品中外源性spike-in RNA反转录形成的cDNA模板。

& PTC：阳性PCR对照，已交联DNA阳性质粒模板，主要用于实时监测array反应板的PCR扩增效率。

推荐：

Human Signal Transduction PathwayFinder PCR Array，人信号转导通路finder PCR array：HU-STPF-084

Mouse Signal Transduction PathwayFinder PCR Array, 小鼠信号转导通路finder PCR array, 货号：MS-STPF-084

Rat Signal Transduction PathwayFinder PCR Array大鼠信号转导通路finder PCR array 货号：RA-STPF-084)：

信号转导通路finder PCR array简介：

这个芯片汇集了10个常用的信号通路的关键基因，包括TGFß Pathway，WNT Pathway，NFκB Pathway，JAK/STAT Pathway，p53 Pathway，Notch Pathway，Hedgehog Pathway，PPAR Pathway，Hedgehog Pathway ，Hypoxia Pathway；可以从中筛选到起作用的信号通路，观察在这些通路上基因是否激活或者受到抑制。QPCR array 提供了您一个非常可信并且容易分析的实验方法。

您可以采用本预制信号通路PCR array，也可以从中间挑选部分通路或者部分基因，进行信号通路的定制。

Human Signal Transduction PathwayFinder PCR Array: HU-STPF-084

Human 信号通路finder PCR array：

TGFß Pathway: ATF4, CDKN1B (p27KIP1), EMP1, GADD45B, HERPUD1, IFRD1, MYC, TNFSF10 (TRAIL).

WNT Pathway: AXIN2, CCND1, CCND2, DAB2, FOSL1 (FRA-1), MMP7 (Matrilysin), MYC, PPARD, WISP1.

NFκB Pathway: BCL2A1 (Bfl-1/A1), BCL2L1 (BCL-X), BIRC3 (c-IAP1), CCL5 (RANTES), CSF1 (MCSF), ICAM1, IFNG, STAT1, TNF.

JAK/STAT Pathway：
JAK1, 2 / STAT1: IRF1.
STAT3: BCL2L1 (BCL-X), CCND1, CEBPD, LRG1, MCL1, SOCS3.
STAT5: BCL2L1 (BCL-X), CCND1, SOCS3.
JAK1, 3 / STAT6: FCER2, GATA3.

p53 Pathway: BAX, BBC3, BTG2, CDKN1A (p21CIP1/WAF1), EGFR, FAS (TNFRSF6), GADD45A, PCNA, RB1.

Notch Pathway: HES1, HES5, HEY1, HEY2, HEYL, ID1, JAG1, LFNG, NOTCH1.

Hedgehog Pathway: BCL2, BMP2, BMP4, PTCH1, WNT1, WNT2B, WNT3A, WNT5A, WNT6.

PPAR Pathway: ACSL3, ACSL4, ACSL5, CPT2, FABP1, OLR1, SLC27A4, SORBS1.

Oxidative Stress: FTH1, GCLC, GCLM, GSR, HMOX1, NQO1, SQSTM1, TXN, TXNRD1.

Hypoxia: ADM, ARNT, CA9, EPO, HMOX1, LDHA, SERPINE1 (PAI-1), SLC2A1, VEGFA.

Mouse Signal Transduction PathwayFinder PCR Array小鼠信号通路finder PCR array：：MS-STPF-084

TGFß Pathway: Atf4, Cdkn1b (p27Kip1), Emp1, Gadd45b, Herpud1, Ifrd1, Myc, Tnfsf10 (Trail).

WNT Pathway: Axin2, Ccnd1, Ccnd2, Dab2, Fosl1 (Fra-1), Mmp7 (Matrilysin), Myc, Ppard, Wisp1.

NFκB Pathway: Bcl2a1a (Bfl-1/A1), Bcl2l1 (Bcl-x), Birc3 (c-IAP1), Ccl5 (Rantes), Csf1 (Mcsf), Icam1, Ifng, Stat1, Tnf.

JAK/STAT Pathway:JAK1, 2 / STAT1: Irf1.

STAT3: Bcl2l1 (Bcl-x), Ccnd1, Cebpd, Lrg1, Mcl1, Socs3.

STAT5: Bcl2l1 (Bcl-x), Ccnd1, Socs3.JAK1, 3 / STAT6: Fcer2a, Gata3.

p53 Pathway: Bax, Bbc3, Btg2, Cdkn1a (p21Cip1/Waf1), Egfr, Fas (Tnfrsf6), Gadd45a, Pcna, Rb1.

Notch Pathway: Hes1, Hes5, Hey1, Hey2, Heyl, Id1, Jag1, Lfng, Notch1.

Hedgehog Pathway: Bcl2, Bmp2, Bmp4, Ptch1, Wnt1, Wnt2b, Wnt3a, Wnt5a, Wnt6.

PPAR Pathway: Acsl3, Acsl4, Acsl5, Cpt2, Fabp1, Olr1, Slc27a4, Sorbs1.

Oxidative Stress: Fth1, Gclc, Gclm, Gsr, Hmox1, Nqo1, Sqstm1, Txn1, Txnrd1.

Hypoxia: Adm, Arnt, Car9, Epo, Hmox1, Ldha, Serpine1 (PAI-1), Slc2a1, Vegfa.

Rat Signal Transduction PathwayFinder PCR Array，大鼠信号通路finder PCR array 货号：RA-STPF-084

TGFβ Pathway: Atf4, Cdkn1b (p27Kip1), Emp1, Gadd45b, Herpud1, Ifrd1, Myc, Tnfsf10 (Trail).

WNT Pathway: Axin2, Ccnd1, Ccnd2, Dab2, Fosl1 (Fra-1), Mmp7 (Matrilysin), Myc, Ppard, Wisp1.

NF?B Pathway: Bcl2a1 (Bfl-1/A1), Bcl2l1 (Bcl-x), Birc3 (c-IAP1), Ccl5 (Rantes), Csf1 (Mcsf), Icam1, Ifng, Stat1, Tnf.

JAK/STAT Pathway:JAK1, 2 / STAT1: Irf1.

STAT3: Bcl2l1 (Bcl-x), Ccnd1, Cebpd, Lrg1, Mcl1, Socs3.

STAT5: Bcl2l1 (Bcl-x), Ccnd1, Socs3.JAK1, 3 / STAT6: Fcer2, Gata3.

p53 Pathway: Bax, Bbc3, Btg2, Cdkn1a (p21Cip1/Waf1), Egfr, Fas (Tnfrsf6), Gadd45a, Pcna, Rb1.

Notch Pathway: Hes1, Hes5, Hey1, Hey2, Heyl, Id1, Jag1, Lfng, Notch1.

Hedgehog Pathway: Bcl2, Bmp2, Bmp4, Ptch1, Wnt1, Wnt2b, Wnt3a, Wnt5a, Wnt6.

PPAR Pathway: Acsl3, Acsl4, Acsl5, Cpt2, Fabp1, Olr1, Slc27a4, Sorbs1.

Oxidative Stress: Fth1, Gclc, Gclm, Gsr, Hmox1, Nqo1, Sqstm1, Txn1, Txnrd1.

Hypoxia: Adm, Arnt, Car9, Epo, Hmox1, Ldha, Serpine1 (PAI-1), Slc2a1, Vegfa.

推荐2：Human Stress & Toxicity PathwayFinderPCR Array（人应激和毒性pathwayfinder PCR Array）

介绍：这是一款通用的人应激和毒性pathwayfinder：

Oxidative Stress（氧化应激）: FTH1, GCLC, GCLM, GSR, GSTP1, HMOX1,NQO1, PRDX1, SQSTM1, TXN, TXNRD1.

Hypoxia: ADM, ARNT, BNIP3L, CA9, EPO, HMOX1, LDHA, MMP9(Gelatinase B), SERPINE1 (PAI-1), SLC2A1, VEGFA.

Osmotic Stress（渗透性应激）: AKR1B1, AQP1, AQP2, AQP4, CFTR, EDN1,HSPA4L, NFAT5, SLC5A3.

Cell Death（细胞死亡）:

Apoptosis: CASP1 (ICE), FAS, MCL1, TNFRSF10A,TNFRSF10B (DR5), TNFRSF1A.

Autophagy: ATG5, ATG7, ATG12, BECN1, FAS, ULK1.

Necrosis:FAS (TNFRSF6), GRB2, PARP1 (ADPRT1), PVR, RIPK1,TNFRSF10A, TNFRSF1A, TXNL4B.

Inflammatory Response(炎症应答):CCL2 (MCP-1), CD40LG (TNFSF5), CRP,IFNG, IL1A, IL1B, IL6, IL8, TLR4, TNF.

DNA Damage Signaling (DNA损伤):

Cell Cycle Checkpoint/Arrest: CDKN1A (p21CIP1/WAF1), CHEK1, CHEK2(RAD53), DDIT3 (GADD153/CHOP), HUS1, MRE11A, NBN (NBS1), RAD17, RAD9A.

Other Responses: ATM, ATR, DDB2, GADD45A, GADD45G,RAD51, TP53, XPC.

Heat Shock Proteins/Unfolded Protein Response（热休克蛋白等）: ATF4, ATF6, ATF6B, BBC3, BID, CALR,DDIT3, DNAJC3, HSP90AA1, HSP90B1 (TRA1), HSPA4 (HSP70), HSPA5 (GRP78).

推荐3：Human Cancer PathwayFinder PCR Array（人癌症Pathway Finder PCR Array）

介绍：这是一款通用的癌症pathwayfinder，包括细胞循环/DNA 损伤修复；

Cell Cycle Control & DNA DamageRepair（细胞循环/DNA 损伤修复）:

ATM, BRCA1, CCNE1 (cyclin E1), CDC25A,CDK2, CDK4, CDKN1A (p21Waf1), CDKN2A (p16Ink4), CHEK2 (chk2 / Rad53), E2F1,MDM2, RB1, S100A4, TP53 (p53).

Apoptosis and Cell Senescence(细胞凋亡和细胞衰老):

APAF1, BAD, BAX, BCL2, BCL2L1 (bcl-X),CASP8, CFLAR (CASPER), FAS, GZMA, HTATIP2, TERT (telomerase), TNFRSF1A (TNF-areceptor), TNFRSF10B (DR5), TNFRSF25 (DR3).

Signal Transduction Molecules andTranscription Factors（信号转导分子和转录因子）:

AKT1, ERBB2, ETS2, FOS, JUN, MAP2K1(MEK), MYC, NFKB1 (NFκB), NFKBIA (IκBα), PIK3R1 (PI3K p85α), RAF1, SNCG.

Adhesion（粘附分子）:

ITGA1 (integrin α1), ITGA2 (integrinα2), ITGA3 (integrin α3), ITGA4 (integrin α4), ITGAV (integrin αV), ITGB1(integrin β1), ITGB3 (integrin β3), ITGB5 (integrin β5), MCAM, MTSS1, PNN, SYK,EPDR1.

Angiogenesis（血管生成）:

ANGPT1 (angiopoietin-1), ANGPT2(angiopoietin-2), COL18A1 (endostatin), FGFR2, IFNA1 (IFNα), IFNB1 (IFNβ),IGF1, IL8, PDGFA, PDGFB, TEK (tie-2), TGFB1, TGFBR1 (ALK-5), THBS1 (thrombospondin-1),TNF, VEGFA.

Invasion and Metastasis（细胞侵入和瘤转移）:

MET, MMP1 (collagenase-1), MMP2(gelatinase A), MMP9 (gelatinase B), MTA1, MTA2, NME1, NME4, PLAU, PLAUR,S100A4, SERPINB5 (maspin), SERPINE1 (PAI1), TIMP1, TIMP3, TWIST1.

也许，您要说，我不想检测那么多，我只想检测一两条通路，怎么办？

上面的PCR Array，每一条通路，您都可以自由组合，作为您DIY的PCR Array，您看人性化吧！

品牌	货号	品名	规格	特性	价格
BioTNT	A2020A0012H/B	PCR ARRAY of Human Antibacterial Response+ primer	250板	human	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0012H/S	PCR ARRAY of Human Antibacterial Response	96孔/板	human	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0012M	PCR ARRAY of Mouse Antibacterial Response	384孔/板	mouse	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0012M/B	PCR ARRAY of Mouse Antibacterial Response+ primer	250板	mouse	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0012M/S	PCR ARRAY of Mouse Antibacterial Response	96孔/板	mouse	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0012R	PCR ARRAY of Rat Antibacterial Response	384孔/板	rat	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0012R/B	PCR ARRAY of Rat Antibacterial Response+ primer	250板	rat	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0012R/S	PCR ARRAY of Rat Antibacterial Response	96孔/板	rat	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0013H	PCR ARRAY of Human Antifungal Response	384孔/板	human	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0013H/B	PCR ARRAY of Human Antifungal Response+ primer	250板	human	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0013H/S	PCR ARRAY of Human Antifungal Response	96孔/板	human	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0013M	PCR ARRAY of Mouse Antifungal Response	384孔/板	mouse	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0013M/B	PCR ARRAY of Mouse Antifungal Response+ primer	250板	mouse	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0013M/S	PCR ARRAY of Mouse Antifungal Response	96孔/板	mouse	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0013R	PCR ARRAY of Rat Antifungal Response	384孔/板	rat	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0013R/B	PCR ARRAY of Rat Antifungal Response+ primer	250板	rat	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0013R/S	PCR ARRAY of Rat Antifungal Response	96孔/板	rat	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0014H	PCR ARRAY of Human Antiviral Response	384孔/板	human	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0014H/B	PCR ARRAY of Human Antiviral Response+ primer	250板	human	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0014H/S	PCR ARRAY of Human Antiviral Response	96孔/板	human	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0014M	PCR ARRAY of Mouse Antiviral Response	384孔/板	mouse	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0014M/B	PCR ARRAY of Mouse Antiviral Response+ primer	250板	mouse	￥7200 ￥5538
BioTNT	A2020A0014M/S	PCR ARRAY of Mouse Antiviral Response	96孔/板	mouse	￥2510 ￥1930
BioTNT	A2020A0014R	PCR ARRAY of Rat Antiviral Response	384孔/板	rat	￥6010 ￥4622
BioTNT	A2020A0014R/B	PCR ARRAY of Rat Antiviral Response+ primer	250板	rat	￥7200 ￥5538

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BioTNT Custom qPCR Arrays

^{研究信号通路和生物学过程需要更灵活的基因检测方式。除了目录PCR Array之外，BioTNT提供PCR Array 定制服务，为定量检测客户指定基因的表达量差异而设置。每对特定基因引物均经过实验确证。}

^{根据检测基因数量和重复次数，BioTNT可提供6种384孔板的排布方式供客户选择。}

^{定制产品同样包含各种不同种类的对照，用以监测样品质量、RT和PCR反应效率、复孔的重复性等。}

^{质量控制：}

_{1. biotnt gene qPCR array中检测的基因引物，经实验验证结果分析，融解曲线均呈单一锐锋，电泳条带均呈单一条带，说明这些引物均是特异扩增引物，验证合格。}

_{2. PTC（阳性对照）反应孔，从融解曲线上分析均呈单一锐锋，从扩增曲线上分析，CT值介于18～22之间。}

_{3. RTC（spike-in反转录对照）反应孔，从融解曲线上分析均呈单一锐锋，从扩增曲线上分析，CT值介于17～23之间。}

_{4. HGDC 的CT 值应大于35，说明样本中没有基因组污染。}

_{5. RTC和 PTC的三重复CT 值应比较接近，说明实验重复性好。}

_{6. 板与板之间（批内）重复性达0.99以上，具有高度重复性。}

^{为达到Array产品的最佳性能，请使用配套试剂Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit：A2010B0B03 和Biotnt qPCR Premix Kit： A2010A0112；抽提建议采用Qiagen RNeasy Mini Kit (50) 74104；RNase-Free DNase Set (50)，79254}

订购货号：

Cat. No.	Product name	Species	Number of genes	Number of plates	Document
HU-PA-cus-基因数量	BioTNT qPCR Arrays Custom Services	human	数量	Variable	Variable
MS-PA-cus-基因数量	BioTNT qPCR Arrays Custom Services	mouse	数量	Variable	Variable
RA-PA-cus-基因数量	BioTNT qPCR Arrays Custom Services	rat	数量	Variable	Variable

板式排列：

format	基因数量	样本数量	内参	RTC/PTC/GDC
384板	372	1 sample/板（单孔）	3个	3/3/3
384板	180	2 sample /板（单孔）	3个	3/3/3
384板	116	3 sample /板（单孔）	3个	3/3/3
384板	84	4 sample /板（单孔）	3个	3/3/3
384板	56	6 sample /板（单孔）	3个	2001/3/1
384板	40	8 sample /板（单孔）	3个	2001/3/1
384板	26	12 sample /板（单孔）	3个	0/3/0
384板	18	16 sample /板（单孔）	3个	0/3/0
384板	10	24 sample /板（单孔）	3个	0/3/0

注：当样本数量比较多时，建议在进行QPCR Array之前另行验证RTC/ GDC等质控参数；

24 sample /板，10目的基因（最多16基因）

12 sample /板，26目的基因（最多32基因）

8 sample /板，40目的基因（最多48基因）

4 sample /板，84目的基因（最多96基因）

1 sample /板，372目的基因（最多384基因）

一．用户需要自备的材料和仪器

A2020A201 mRNA逆转录试剂盒 for PCR array

A2010A001 Realtime PCR PreMIX（染料法）

^{RNA 抽提：推荐使用Qiagen
RNeasy Mini Kit (50) 74104，RNase-Free DNase Set (50)，79254}

^{DNase/RNase free枪头，PCR反应管，1.5 mL离心管}

^{10 μL到1,000
μL可调节单通道微量移液器以及适配的枪头}

^{5 μL到20
μL可调节多通道微量移液器以及适配的一次性枪头}

^{定量qPCR仪器}

384 微孔板排列（24*16）：每块板分为四个区，不同区内可以加入不同的样本；

二．实验步骤：

2.1 实验前准备

注意事项：

1. 开始实验前请仔细阅读产品使用手册。注意：请确认qPCR array 与您的qPCR仪器匹配；

2. 严格按照QPCR标准步骤操作，采用以上推荐试剂盒进行抽提mRNA，注意去除基因组污染；避免核酸污染和非特异性扩增。

^{RNA 定量与质量控制}

^{A. 使用无菌水(RNase-free)稀释
RNA 样本，检测 260 nm
和 280 nm 吸光值，A260/280
应大于 1.8。}

^{B. 使用公式A260×
40 ×稀释倍数 = XXXXμg/mL
计算 RNA 浓度。}

^{C. 使用琼脂糖凝胶电泳检测 RNA
完整性。}

^{D. 建议：RNA
质量测定后，逆转录得到CDNA，建议用多个内参基因自行验证CDNA 质量；}

3. 基因组DNA污染控制

^{每个Array板块上的GDC(Genomic
DNA Control)反应孔专为检测每个样品进行qPCR反应时可能存在的基因组DNA污染而设置。如果该反应孔的CT值小于35，则表明存在可检测到的基因组DNA污染，应采取措施予以解决。因此，必须从RNA样品中去除基因组和其他全部残余污染物。建议采用Qiagen
柱式抽提过程中加入DNAse去除基因组污染。}

4. RNA 含量调平：实验样本的RNA 尽量调到同一水平；加入RNA 酶free的水，调整RNA 浓度；

^{预计每个样本需要的 RNA
量和RT-PCR反应数(逆转录CDNA；采用逆转录试剂盒进行，每个样本准备100ul的CDNA)；}

2.2 PCR-Array 实验步骤：

^{1．从-20度冰箱拿出PCR Array，平衡到室温后拆开自封袋，取出PCR Array的384板；}

^{2．
融解并充分混匀BioTNT QPCR 染料法premix，短暂离心使管中试剂处于底部，冰上保存。（一块384板需要使用4.4 ml premix）；}

^{3．
去除积存在封闭反应板表面的冷凝物。小心撕去板上的密封膜。}

^{4．样本加样，进行QPCR 实验；配制过程在冰上操作。}

^{qPCR array 可对同一样本中多个基因同时进行检测，为了充分满足实验需要以及避免实验操作产生的损耗，在配制qPCR反应液时需要比实际体积多出 10%。}

^{充分混匀qPCR反应液，短暂离心。每个反应孔精确加入
20 μl 反应液。每次加样都需要换用新的枪头以避免交叉污染。}

^{准备PCR
混合物：样本1准备100ul CDNA，加入1ml PCR
水和1ml premix（采用BioTNT premix，货号：A2010A0112），混合。}

^{区一有96孔，样本一的混合物每孔加入混合物20ul；}

^{同理，样本2的混合物加入区二的96孔中，每孔加入混合物20ul；}

^{同理，样本3的混合物加入区二的96孔中，每孔加入混合物20ul；}

^{同理，样本4的混合物加入区二的96孔中，每孔加入混合物20ul；}

^{5．使用产品包装中的新密封膜覆盖qPCR反应板，确保密封膜粘贴平整和紧密以防止光线折射和蒸发损耗。把384板放入板式离心机，2000rpm
离心2分钟；去除气泡。}

^{6．开始qPCR反应，推荐使用下表中两步法qPCR反应程序。当使用SYBR Green
染料监测qPCR反应时，需要在qPCR循环结束后立即进行溶解曲线分析。}

【扩增条件】

以ABI 7900，7900，ViiA7(384 well block)为例，Detector设为SYBR, QUENCHER设为NONE,

95℃ 5分钟→95℃ 5秒→60℃ 30秒（读板）→溶解曲线分析

└ 40个循环 ┘

三、数据导出后进行分析；

3.1 数据分析

基本设置

1. 确定基线

^{基线是qPCR扩增前期的荧光本底信号，一般都由仪器自动设置。不同仪器类型，基线的设置也略有不同，往往在荧光信号指数扩增阶段的前几个循环处，一般将定量PCR的前15个循环信号作为荧光本底信号，如果实验数据中最低CT还小于基线的设置上限，研究人员则需要手动设置。其设置原则为：起始值设置为2或3，终止值的设置为整个反应板中扩增最强检测因子的CT值减去2或3所得的值即可，一般设置在2-10的范围内，不要超过15。}

2. 设定阈值

^{荧光阈值的正确设置是进行数据分析的关键一步，荧光阈值的设置往往在荧光信号指数扩增的起始阶段。一般情况下，内参基因的表达水平往往高于大多数的检测基因。}

3. CT值的获得

^{所谓CT值就是在荧光PCR扩增过程中，当扩增产物的荧光信号达到设定的阈值（Threshold）时所经过的扩增循环次数（cycle），被称为CT值。}

4. 多数的定量PCR仪是以Excel的形式导出CT值。

5. 选取合适的内参基因，用ΔΔCT数据分析方法对定量PCR结果进行相对定量分析。

6. 所有CT值大于35或显示N/A，均认为没有检测到该基因的表达。计算时按照CT值为35进行计算。

3.2 质量控制：

^{1. 通过定量PCR仪器分析软件检查每个检测基因的扩增曲线及融解曲线，每个内参基因、目的基因PCR的融解曲线均特异性的显示单峰。}

^{2. PTC（阳性对照）反应孔，从融解曲线上分析均呈单一锐锋，从扩增曲线上分析，CT值介于17～23之间。}

^{3. RTC（spike-in反转录对照）反应孔，从融解曲线上分析均呈单一锐锋，从扩增曲线上分析，CT值介于17～23之间。}

^{4. 检查GDC(基因组DNA污染)反应孔的CT值。如果GDC反应孔CT值大于35，表明样本中存在的少量基因组DNA污染不会影响基因表达定量检测结果。}

^{5. RTC和 PTC的三重复CT 值应比较接近，说明实验重复性好。}

3.3数据分析

_{下载数据分析系统 (http://www.biotnt.com)进行数据分析。此数据分析系统采用ΔΔCt 法来实现
fold-change 分析或基因的表达量水平(CT值)统计学分析。}

^{1. 在开始分析前请下载并阅读“Biotnt Array数据分析操作指南”。}

^{2. 将CT值输入相应的数据分析模板(Sample
Data.xls和 Control Data.xls)，选择合适的参照和分析参数。}

^注意：^{被选作采用ΔΔCt
法对qPCR Primer Array标准化的参数必须不受实验设计影响。}

^{因此需采用一个或多个已经过实验确证的参数。参数的单个CT值或平均值可用于标准化实验。}

^{3. 完成指定分析。实验重复至少3次后会得到统计数值(p值)。通过分析数据结果即可简便快捷的筛选出您感兴趣的基因，便于以后的研究。}

使用限制

^{以下条款适用于BioTNT QPCR
Array产品。产品购买者需遵守最终用户限制许可条例。本产品仅限购买者内部研究使用，不得使用于人体或诊断、治疗。未经BioTNT
事先书面同意，本产品不得转售，不得重新包装或修改后转售，不得用于生产商用产品。}

质量保证

^{BioTNT保证产品与产品数据表中描述的规格保持一致。}

^{若经BioTNT证实产品未达到规格要求，BioTNT 将为您替换此产品。若无法替换，BioTNT将退款给购买者。此质量保证仅适用于最初产品购买者。}

^{BioTNT仅负责替换产品或退还实际的购买金额。对于由使用或不正确使用产品产生的损害或使用其他相关材料和试剂产生的损耗，BioTNT不承担责任。BioTNT不提供任何形式的明示的或者默示的保证，包括对适销性、适用于特定用途的默示保证。}

BioTNT致力于为消费者提供高质量的研究产品。如果您对BioTNT的产品有任何问题或疑虑，请拨打电话4008801880联系。

BioTNT PCR Array Excel 分析软件简要介绍

分析软件下载

Note：黄色框的内容是可以改变的；灰色和白色的单元格用于计算或者结果，请不要改变。

1. Gene Table 的 C1单元格请放入PCR Array的名称。Gene Table 下面的黄色内容，可以复制粘贴biotnt 提供给您的基因列表

PCR Array Catalog:

Position

Symbol

Description

RefSeq

Gene Name

…

2. Test sample Data 表中，按照检测的样本，分别Copy Ct 值（ test sample）; 最多可以copy 10个样本；excel 模板在右侧会自动计算出平均值和SD 值

Gene

Well

Control Sample

exp 1

exp 2

exp 3

exp 4

exp 5

exp 6

exp 7

exp 8

exp 9

exp 10

基因1

A01

25.4

基因2

A02

34.6

…..

…

H12

17.9

3. 类似的，在control sample Data 表中的黄色单元格中拷贝您的real-time PCR CT 值。最多可以copy 10个样本；excel 模板在右侧会自动计算出平均值和SD 值

4.在choose Housekeeping Genes ，A列的黄色单元格中，输入内参基因的名称（你想用来做均一化处理的内参基因）。本模板最多可容纳20个内参基因

…

Housekeeping
Gene Symbol

Well

Test Sample

Well

Control Sample

exp1

exp2

exp3

exp1

exp2

exp3

B2M

H01

6.92

H01

6.92

HPRT1

H02

20.15

H02

20.15

RPL13A

H03

20.84

H03

20.84

GAPDH

H04

16.35

H04

16.35

ACTB

H05

15.82

H05

15.82

…

本模板会自动显示出这两类样本（test sample和control sample）您选择的内参基因的Ct 平均值。

5. 在Results工作表中，本模板可以自动计算出每个基因的表达差异（test sample 和control sample 之间）。如果样本有重复，可自动计算出P值（T-检验）。

"Results" 工作表的E2 和 F2单元格可以改变样本的名称。这样其他所有工作表的样本名称都会发生改变。

6. 结果同时在 "3D Profile", "Scatter Plot", 和"Volcano Plot"的工作表中显示。

3D Profile 是根据两类样本的各个基因的表达差异进行绘图而得，采用PCR Array 96孔的形式。向上的列(z-轴值 > 1) 表示基因表达上调（test sample vscontrol sample）；向下的列(z-轴值 < 1) 表示基因表达上调（test sample vscontrol sample）； Scatter Plot绘制的是 control sample Vs test sample的((2 ^ (-DCt)) 表达水平。黑色的线标明fold changes ((2 ^ (-DDCt)) 为1。粉色的线标明的是您想要确定的fold change，是由用户来确定的，您可以把您想确定的值写到黄色的A1单元格中。每个轴的值可通过双击轴，来重新界定您想使用的标准的 Microsoft Excel表格。轴的title 可通过click 来进行编辑。 Volcano Plot 绘制的是样本的log2 fold change和P值（从T-检验）之间的关系。黑色的线标明fold changes为1。粉色的线预示了基因表达的阈值，是由用户来确定的，可输入到黄色单元格D1中。蓝色线表示t-检验的阈值，预示了用户想要的p值的阈值，可输入到黄色单元格l1中。双击轴可以调整本图表应用的数据表，从而通过选择Microsoft Excel 进行重新设置。轴的title 可通过click 来进行编辑。

7. 质控分析： "QC Report" 工作表

工作表中包括 positive PCR（PTC), the reverse transcription(RTC) 和genomic DNA controls（GDC)。确定使用BioTNT cDNA Synthesis Kit，以保证得到精确的QC 结果。

说明:表格中的数据仅为说明提供。通过copy和paste 覆盖相应数据。 A set of sample data is included in this template for demonstration purposes only. Simply replace the existing data with your own through the Copy and Paste operations described above.

注意: 在 "Results"工作表中计算的基因相对表达值 (2 ^ (-Δ Ct)) 公式为：
Δ Ct = Ct (GOI) – avg. (Ct (HKG)), 其中GOI 是目的基因, HKG 为内参基因（ housekeeping genes）。平均值的计算列在Calculations 工作表中。

PCR Array 实验相关产品订购指南：

一、RNA 抽提：

经验证，可以使用以下产品进行样品RNA 抽提， RNA抽提质量符合PCR Array实验样本质量要求：

品名	货号	产品分类	品牌	规格
磁珠法RNA抽提试剂盒（组织/细胞）	A2010A103	qPCR kits/RNA 抽提	BioTNT	50T
磁珠法RNA抽提试剂盒（血液，体液）	A2010A104	qPCR kits/RNA 抽提	BioTNT	50T
磁珠法RNA抽提试剂盒（酵母细胞）	A2010A105	qPCR kits/RNA 抽提	BioTNT	50T
RNeasy Mini Kit（50）	74104	RNA 抽提	Qiagen	50T
RNase-Free DNase Set (50)	79254	RNA 抽提	Qiagen	50T

请根据您的样本选择抽提试剂盒；无论您是否采用nor-fareast;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin; color:red">请根据您的样本选择抽提试剂盒；无论您是否采用bioTNT 提供的抽提试剂盒，请在进行逆转录和QPCR 实验前进行RNA 和CDNA 样品质量验证；验证方式见附录；

二、逆转录实验：

品名	货号	产品分类	品牌	规格
mRNA逆转录试剂盒 for PCR array	A2020A201S	PCR Array	BioTNT	6T（100ul）
mRNA逆转录试剂盒 for PCR array	A2020A201	PCR Array	BioTNT	12T（100ul）
PCR Array 样本CDNA质量验证kit	A2020A301	PCR Array	BioTNT	50T

根据您的样品数量，选择逆转录试剂盒的规格；可以在r-fareast;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin; color:red">根据您的样品数量，选择逆转录试剂盒的规格；可以在RNA 验证合格后先小批量逆转录样本，并进行样本质量验证；质量合格后进行PCR Array实验；

三、PCR Array：

BioTNT PCR Array 分为预制PCR Array 和定制PCR Array；基本上任意一台的qPCR 仪器都可以进行qPCR Array的实验。

BioTNT根据仪器采用的96孔或者384孔板，分为以下5种板型（plate format）：

plate format	Instrument provider	QPCR instrument model
A(384well)	lifetechnologies	7900，ViiA7(384 well block)
B(96 well)	lifetechnologies	7300,7500,7700,7900（standard 96well），ViiA7（standard 96well）
C(96 well)	lifetechnologies	7500(fast block)，7900HT（fast block），stepone plus，ViiA 7(Fast block)
D(96 well)	Biorad	iCycler，MyiQ, iQ5
E(96 well)	Biorad	CFX96，DNA Engine opticon，opticon 2，Chromo4

请您在订购时提供您使用的qPCR仪器，我们也可以为您确定plate format；如果您的仪器不在以上清单上，也可以邮件咨询我们，我们会有专业的技术人员为您确定相应的plate format。

A 型384孔板，B型C型D型E型，一块板的预制和定制的价格见下表；根据是否配premix，货号也有区别；另外，定制的价格也见下表：

描述	货号	产品分类	品牌	规格
预制PCR Array (384板）	A2020A202	PCR Array	BioTNT	384板（A型）
预制PCR Array (384板）+Premix	A2020A202-M	PCR Array	BioTNT	384板（A型）
定制PCR Array (384板）	A2020A203	PCR Array	BioTNT	384板（A型）
定制PCR Array (384板）+Premix	A2020A203-M	PCR Array	BioTNT	384板（A型）
预制PCR Array （96板）	A2020A204	PCR Array	BioTNT	96板（BCDE型）
预制PCR Array （96板）+Premix	A2020A204-M	PCR Array	BioTNT	96板（BCDE型）
定制PCR Array （96板）	A2020A205	PCR Array	BioTNT	96板（BCDE型）
定制PCR Array （96板）+Premix	A2020A205-M	PCR Array	BioTNT	96板（BCDE型）

根据您的仪器确定您的板型（areast-font-family:宋体;mso-fareast-theme-font:minor-fareast;mso-hansi-theme-font: minor-fareast">根据您的仪器确定您的板型（format），并根据您的样本数量和来确定您购买的数量；建议您购买含有Premix的PCR Array 试剂盒（货号末尾-M）。

根据您的通路名称，在biotnt 网站查找相应的PCR Array名；如果没有预制的PCR Array，您也可以选择定制PCR Array。或者您把您的基因名称提供给我们，我们为您设计定制PCR Array。

附件：

样品质量验证：

为了保证PCR Array实验的质量，建议在使用前先进行样本质量验证；

RNA 定量与质量控制

a) 使用无菌水(RNase-free)稀释 RNA 样本，检测 260 nm 和 280 nm 吸光值，A260/280 应大于 1.8。

b) 使用公式A260× 40 ×稀释倍数 = XXXXμg/mL 计算 RNA 浓度。

c) 使用琼脂糖凝胶电泳检测 RNA 完整性。

d) 建议：RNA质量测定后，逆转录得到cDNA，建议用多个内参基因自行验证cDNA质量；

推荐购买BioTNT的样本质量验证引物套装，可以在进行qPCR 之前对样本进行验证(包含内参引物，如human beta actin， GAPDH, 18sRNA等)

e) 基因组DNA污染控制

每个Array板块上的GDC(Genomic DNA Control)反应孔专为检测每个样品进行qPCR反应时可能存在的基因组DNA污染而设置。如果该反应孔的CT值小于35，则表明存在可检测到的基因组DNA污染，应采取措施予以解决。因此，必须从RNA样品中去除基因组和其他全部残余污染物。建议采用Qiagen 柱式抽提过程中加入DNAse去除基因组污染。

建议在进行PCR Array 之前购买BioTNT 样本质量验证引物套装或者单独的GDC引物进行基因组DNA 污染控制的质量验证；验证结果CT 值如果小于35，则表明存在可检测到的基因组DNA污染，应采取措施予以解决。

_{^{qPCR Array是信号通路基础生物学研究和临床疾病研究的重要工具。这种功能分类芯片运用成熟的SYBR Green荧光定量PCR技术，专注于一个信号通路中基因的表达水平检测。与传统的高密度表达谱芯片相比，Q-PCR array具有针对性强、灵敏度高、准确可靠等优点。芯片上的基因包括了与研究对象有确定关系的基因，或至少是与研究对象的关系有待考证的基因。如果研究对象是某一生物学通路的基因，则使用针对该类基因的功能分类基因芯片比使用高密度表搭配芯片更加有效便利。}}

美国SABioscience公司是Qiagen旗下子公司，在Q-PCR array领域具有国际领先地位。目前SABioscience公司针对不同的信号通路和疾病相关基因设计了150多款功能分类芯片，种属包括人、小鼠、大鼠、果蝇、猪、兔、鸡等，格式分为96孔和4 x 96孔两种。针对客户的需求，还有个性化定制芯片服务。BioTNT是SABioscience公司的合作伙伴，能为您提供完善的功能分类基因芯片技术服务，您只需提供保存完好的组织或细胞样品，我们就可为您完成实验操作和数据分析。

BioTNT 同时提供自产QPCR Array 产品，并提供定制QPCR Array 产品。

BioTNT QPCR芯片特点:

l 灵敏度高，样本使用量低；

l 线性范围广，可同时检测表达水平差异大的基因；

l 每个基因的检测引物优化后保证高扩增率和产物单一；

l 重复性高，Ct值的平均差异只有0.25个循环；

BioTNT QPCR Array芯片技术服务流程：

1、选择您要检测的基因；

或者联系Biotnt提供基因名称(发送到sales@biotnt.com )；

2、确定是采用目录QPCR Array还是定制QPCR Array；

确定PCR Array 产品号，确定样本数量，确定是做单孔还是重复；与BioTNT 签订产品合同和服务合同，付定金；

3、客户提供样本；

4、BioTNT 对客户提供的样本进行干冰取样，RNA 抽提

5、客户样本RNA抽提：

a) 若实验对象为组织样本，取适量（50-100mg）新鲜组织或正确保存的样本，加1mL的Trizol，匀浆后抽提RNA，采用Qiagen RNeasy Mini Kit (50) 74104，RNase-Free DNase Set (50)，79254进行抽提RNA，在抽提的过程中加入DNase，去除基因组DNA。

b)若实验对象为细胞样本，每份样本取1*106-107细胞，完全吸去培养液后加 1mL的Trizol，裂解后提取RNA，采用Qiagen RNeasy Mini Kit (50) 74104，RNase-Free DNase Set (50)，79254进行抽提RNA，在抽提的过程中加入DNase，去除基因组DNA。

6、RNA质量检测

a) 采用NanoDrop测定RNA浓度，OD比值（260nm和280nm处的OD值），并评测RNA质量。

质量符合要求的可进行下一步实验；

RNA质量如需进一步评估，可以采用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析（选测）。

不符合要求的需要重新提供样品送检；

7、cDNA模板制备

均一化RNA 浓度，按照cDNA第一链合成试剂盒将样本RNA逆转录为cDNA。

8、实时定量PCR

实验前先采用CDNA 选测内参基因进行第二次质检；质检合格的进行正式QPCR Array 实验；

根据说明将cDNA模板适当稀释后加入到实时定量PCR反应混合液中，然后QPCR Array板上（预包被了特异性引物）加入等量反应液，采用ABI ViiA7进行实时定量PCR反应。

9、数据处理：

利用仪器配套软件计算PCR芯片中的每个基因的Ct值。

按照BioTNT QPCR Array 分析软件，分别copy test sample和control sample 的CT值到excel 表中。

根据excel 表软件，计算是否符合质量控制，选择内参基因，计算基因的表达上调或者下调，筛选出有价值的基因。

10、提供实验报告：

包括详细的实验方法及实时定量PCR芯片实验结果及相关图表。

具体包括：

包括原始数据CT 值；原始数据文件；

包括实验结果；3D-Profile 图表；scatter plot 图表；volcano plot图表；

BioTNT 实时定量PCR 检测使用的仪器

进行检测使用的主要仪器为QPCR， BioTNT 使用life technology新款的ViiA™ 7实时荧光定量PCR系统进行microRNA的QPCR 检测。

ViiA™ 7实时荧光定量PCR系统在单一的高性能仪器上融合了您需要的所有实时荧光定量PCR特性，从而帮助您优化研究效率。ViiA™7系统具有简单的工作流程、直观的软件、触控屏界面以及使误操作降至少的单键实验方案，可提供出众的重复性和小的孔间和仪器间差异。

产率
ViiA™ 7系统适用于中等至高通量实时荧光定量PCR，可提升您的实验室效率。
快速的加热块更换——前开门设计使热循环加热模块的更换变得更容易，无需移动旁边的设备，如机械臂或计算机
简单的触摸屏界面——仪器触摸屏提供了一键式实验方案，可快速简单地完成各种应用Assay的设置
自动化兼容性——ViiA™ 7系统结合了Applied Biosystems® Twister® II 机器人，使您在自动化环境下实现效率大化

整合
可与TaqMan® Array微流体芯片和 Applied Biosystems® TaqMan® Assay完全兼容：实时荧光定量PCR分析的金标准，具有高灵敏度、高特异性和宽动态范围。
384 孔通量且无需机器辅助——采用TaqMan® Array微流体芯片，无需移液机器人或复杂的移液装置；只需加入您的样本和预混液，即可在ViiA™ 7系统上运行
与全套 TaqMan® Assay 兼容——ViiA™ 7系统已经过优化，可用于所有TaqMan® Assay(包括 MicroRNA、蛋白质、非编码 RNA 和Pri-miRNA Assay)，从而获得清晰简洁的数据

性能
ViiA™ 7系统具有下列特点：
OptiFlex® 系统——增强型荧光检测，可实现准确且灵敏的数据分析
大程度的多重分析能力——6 个可自由组合的激发和发射滤光片通道，可实现多的染料组合和大的多重反应能力
灵活的数据采集——多种升降温方法检测形式为升降温阶段的荧光数据采集提供了更多的灵活性
精确定量——在单色反应中可检测出低至1.5倍的拷贝数差异

ViiA™ 7软件具有：
直观的界面和创新的设计
便捷的自动化操作
更强大的数据分析
与高通量完全兼容

可扩展的软件构架
提供可选的附加性能，可升级至现有软件。
遵循美国联邦法规第21章第11节(21 CFR Part 11)——可选的SAE模块，提供记录安全、审计和电子签名信息，从而实现全方位的数据可追溯性
高分辨率熔解曲线(HRM)——采用内置的MeltDoctor™ 实验方案和校准，您可以缩短优化运行的时间，从而将更多的时间用于分析您的结果。通过方便的软件设置即可根据需要设置基因型种类的数目。

仪器

您仅需要提供您要检测的基因和样本；

BioTNT 为您提供QPCR Array 技术服务！！！

更高效！更快捷！

逆转录试剂和以荧光染料SYBR Green 为基础的BioTNT定量检测试剂作为被推荐的RT-qPCR试剂产品可与qPCR Array配套使用。该系列试剂均经过优化，具有高的灵敏度、效率和特异性。

以下每个系列均有人/大鼠/小鼠三个种属，预制的500+PCR Array 产品。

定制PCR Array 可以根据客户提供的基因信息进行定制。定制更灵活方便，适应客户的要求。定制流程可以向sales@biotnt.com 进行咨询。

定制价格为4760元/384板（84个基因及以下）；1块板起订，更灵活；性价比更高！一块384板，BioTNT为您提供以下各种形式的设计：84个基因*4个样本；56个基因*6个样本；40个基因*8个样本；26个基因*12个样本；18个基因*16个样本；10个基因*24个样本的定制；

定制价格为4760元/板；检测芯片服务价格为8760元/板；低仅需：100元/基因（4个样本）；

而且不设低板数！您只要有一板都可以定制噢！

目录芯片价格为4360元/384板（84个基因）；1块板起订；

检测芯片服务价格为8760元/板（您不需要再购买PCR Array 板，抽提mRNA 需要的高品质的提取试剂，去除DNA 污染的DNAse，进行扩增的PCR Premix，特别的逆转录试剂盒）；您仅需要准备好样本，然后交给Biotnt 技术服务中心来为您提供专业的实验服务！

中文品名	系列名	货号
human粘附连接系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Adherens Junctions	A2020A0001H
human脂肪细胞分化系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Adipogenesis	A2020A0002H
humanAging系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Aging	A2020A0003H
human过敏与气喘系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Allergy & Asthma	A2020A0004H
human阿尔茨海默氏病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Alzheimer´s Disease	A2020A0005H
human氨基酸代谢Ⅰ系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Amino Acid Metabolism I	A2020A0006H
human氨基酸代谢Ⅱ系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Amino Acid Metabolism II	A2020A0007H
humanAMPK 信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human AMPK Signaling	A2020A0008H
human雄激素受体信号转导目标系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Androgen Receptor Signaling Targets	A2020A0009H
human血管生成系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Angiogenesis	A2020A0010H
human血管生长因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Angiogenic Growth Factors	A2020A0011H
human抗菌响应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Antibacterial Response	A2020A0012H
human抗真菌响应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Antifungal Response	A2020A0013H
human抗病毒反应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Antiviral Response	A2020A0014H
human细胞凋亡系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Apoptosis	A2020A0015H
human动脉粥样硬化系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Atherosclerosis	A2020A0016H
human自噬系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Autophagy	A2020A0017H
human乳腺癌系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Breast Cancer	A2020A0018H
humancAMP / Ca2+信号转导通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human cAMP/Calcium Signaling Pathway	A2020A0019H
human耐药性肺癌系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cancer Drug Resistance	A2020A0020H
human癌症药物靶标系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cancer Drug Targets	A2020A0021H
human癌症炎症因子和免疫衰减系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cancer Inflammation & Immunity Crosstalk	A2020A0022H
human癌症通路探究系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cancer Pathway	A2020A0023H
human癌症干细胞系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cancer Stem Cells	A2020A0024H
human心脏系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cardiotoxicity	A2020A0025H
human心血管病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cardiovascular Disease	A2020A0026H
human细胞周期系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cell Cycle	A2020A0027H
human细胞死亡通路探究系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cell Death Pathway	A2020A0028H
human细胞结的信号探究系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cell Junction Pathway	A2020A0029H
human细胞谱系鉴定系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cell Lineage Identification	A2020A0030H
human细胞运动系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cell Motility	A2020A0031H
human细胞表面标志系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cell Surface Markers	A2020A0032H
human细胞衰老系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cellular Senescence	A2020A0033H
human细胞应激反应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cellular Stress Responses	A2020A0034H
human趋化因子受体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Chemokines & Receptors	A2020A0035H
human昼夜节律系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Circadian Rhythms	A2020A0036H
human常见的细胞因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Common Cytokines	A2020A0037H
human克罗恩病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Crohn´s Disease	A2020A0038H
human囊性纤维化系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cystic Fibrosis	A2020A0039H
human细胞因子和趋化因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cytokines & Chemokines	A2020A0040H
human细胞骨架调节系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Cytoskeleton Regulators	A2020A0041H
human树突状抗原呈递细胞系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Dendritic & Antigen Presenting Cell	A2020A0042H
human糖尿病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Diabetes	A2020A0043H
humanDNA损伤信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human DNA Damage Signaling Pathway	A2020A0044H
humanDNA修复系列PCR Array	PCR ARRAY of Human DNA Repair	A2020A0045H
human多巴胺和5 - 羟色胺途径系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Dopamine and Serotonin Pathway	A2020A0046H
human药物代谢系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Drug Metabolism	A2020A0047H
human药物代谢：一期酶系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Drug Metabolism: Phase I Enzymes	A2020A0048H
human药物代谢：二期酶系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Drug Metabolism: Phase II Enzymes	A2020A0049H
human药物转运系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Drug Transporters	A2020A0050H
humanEGF / PDGF信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human EGF / PDGF Signaling Pathway	A2020A0051H
human胚胎干细胞系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Embryonic Stem Cell	A2020A0052H
human内皮细胞生物学系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Endothelial Cell Biology	A2020A0053H
human后生的染色质修饰酶系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Epigenetic Chromatin Modification Enzymes	A2020A0054H
human表观染色质重塑因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Epigenetic Chromatin Remodeling Factors	A2020A0055H
human上皮间质转化（EMT）系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Epithelial to Mesenchymal Transition	A2020A0056H
human雌激素受体信号系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Estrogen Receptor Signaling	A2020A0057H
human细胞外基质粘附分子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Extracellular Matrix & Adhesion Molecules	A2020A0058H
human脂肪酸代谢系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Fatty Metabolism	A2020A0175H
human脂肪酸代谢2系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Fatty Acid Metabolism	A2020A0059H
human脂肪肝系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Fatty Acid Metabolism 2	A2020A0060H
human性不孕系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Fatty Liver	A2020A0061H
human纤维化系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Female Infertility	A2020A0062H
human粘着斑系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Fibrosis	A2020A0063H
humanG蛋白偶联受体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Focal Adhesions	A2020A0064H
humanγ-氨基丁酸和谷氨酸系列PCR Array	PCR ARRAY of Human G Protein Coupled Receptors	A2020A0065H
human缝隙连接系列PCR Array	PCR ARRAY of Human GABA & Glutamate	A2020A0066H
human糖皮质激素信号系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Gap Junctions	A2020A0067H
human葡萄糖代谢系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Glucocorticoid Signaling	A2020A0068H
human糖基化系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Glucose Metabolism	A2020A0069H
humanG蛋白偶联受体信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Glycosylation	A2020A0070H
human生长因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human GPCR Signaling Pathway	A2020A0071H
human热休克蛋白分子伴侣系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Growth Factors	A2020A0072H
human猬信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Heat Shock Proteins & Chaperones	A2020A0073H
human造血系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Hedgehog Signaling Pathway	A2020A0074H
human肝毒性系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Hematopoiesis	A2020A0075H
human河马信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Hepatotoxicity	A2020A0076H
human艾滋病毒宿主反应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Hippo Signaling Pathway	A2020A0077H
human同源基因系列PCR Array	PCR ARRAY of Human HIV Host Response	A2020A0078H
human亨廷顿氏病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Homeobox (HOX) Genes	A2020A0079H
human高血压系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Huntington´s Disease	A2020A0080H
human低氧信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Hypertension	A2020A0081H
humanIL6/STAT3信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Hypoxia Signaling Pathway	A2020A0082H
human免疫毒性系列PCR Array	PCR ARRAY of Human IL6/STAT3 Signaling Pathway	A2020A0083H
human诱导多能干细胞系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Immunotoxicity	A2020A0084H
human炎性体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Induced Pluripotent Stem Cells	A2020A0085H
human炎性细胞因子及受体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Inflammasomes	A2020A0086H
human炎症反应和自身免疫系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Inflammatory Cytokines & Receptors	A2020A0087H
human先天免疫和适应性免疫应答系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Inflammatory Response & Autoimmunity	A2020A0088H
human胰岛素抵抗系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Innate & Adaptive Immune Responses	A2020A0089H
human胰岛素信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Insulin Resistance	A2020A0090H
human干扰素受体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Insulin Signaling Pathway	A2020A0091H
humanJAK-STAT信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Interferons & Receptors	A2020A0092H
human白血病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human JAK / STAT Signaling Pathway	A2020A0093H
human脂蛋白信号和胆固醇代谢系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Leukemia	A2020A0094H
human肝癌系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Lipoprotein Signaling & Cholesterol Metabolism	A2020A0095H
human肺癌系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Liver Cancer	A2020A0096H
human淋巴瘤系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Lung Cancer	A2020A0097H
human黄斑变性系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Lymphoma	A2020A0098H
human男性不育症系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Male Infertility	A2020A0100H
humanMAP激酶信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human MAP Kinase Signaling Pathway	A2020A0101H
human间充质干细胞系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Mesenchymal Stem Cells	A2020A0102H
human线粒体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Mitochondria	A2020A0103H
human线粒体能量代谢系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Mitochondrial Energy Metabolism	A2020A0104H
human分子毒理学通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Molecular Toxicology Pathway	A2020A0105H
humanmTOR信号系列PCR Array	PCR ARRAY of Human mTOR Signaling	A2020A0106H
human多发性硬化症系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Multiple Sclerosis	A2020A0107H
humanMYC targets系列PCR Array	PCR ARRAY of Human MYC Targets	A2020A0108H
human坏疽系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Necrosis	A2020A0109H
human肾毒性系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Nephrotoxicity	A2020A0110H
human神经再生系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Neurogenesis	A2020A0111H
human神经细胞的离子通道系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Neuronal Ion Channels	A2020A0112H
human神经毒性系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Neurotoxicity	A2020A0113H
human神经递质受体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Neurotransmitter Receptors	A2020A0114H
human神经营养因子及受体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Neurotrophins & Receptors	A2020A0115H
human核转录因子信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human NFkB Signaling Pathway	A2020A0116H
human核转录因子信号的目标系列PCR Array	PCR ARRAY of Human NFkB Signaling Targets	A2020A0117H
human一氧化氮信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Nitric Oxide Signaling Pathway	A2020A0118H
human信号通路缺口系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Notch Signaling Pathway	A2020A0119H
human信号目标缺口系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Notch Signaling Targets	A2020A0120H
human核受体与辅调节因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Nuclear Receptors & Coregulators	A2020A0121H
human肥胖系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Obesity	A2020A0122H
human癌基因和抑癌基因系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Oncogenes & Tumor Suppressor Genes	A2020A0123H
human渗透胁迫系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Osmotic Stress	A2020A0124H
human成骨系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Osteogenesis	A2020A0125H
human骨质疏松系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Osteoporosis	A2020A0126H
human氧化应激系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Oxidative Stress	A2020A0127H
human模式识别受体系列PCR Array	PCR ARRAY of Human p53 Signaling Pathway	A2020A0129H
human人体抑癌基因信号途径系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Pain: Neuropathic & Inflammatory	A2020A0130H
human神经性疼痛和炎症系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Parkinson´s Disease	A2020A0131H
human帕金森氏病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Pattern recognition receptor	A2020A0128H
human吞噬作用系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Phagocytosis	A2020A0132H
humanPI3K-AKT 信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human PI3K-AKT Signaling Pathway	A2020A0133H
humanPolycomb & Trithorax复合物系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Polycomb & Trithorax Complexes	A2020A0134H
humanPolycomb & Trithorax靶基因系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Polycomb & Trithorax Target Genes	A2020A0135H
human多囊肾病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Polycystic Kidney Disease	A2020A0136H
humanPPAR靶基因系列PCR Array	PCR ARRAY of Human PPAR Targets	A2020A0137H
human先兆子痫系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Pre-Eclampsia	A2020A0138H
human初级纤毛系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Primary Cilia	A2020A0139H
human前列腺癌系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Prostate Cancer	A2020A0140H
human蛋白酶激活受体信号系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Protease Activated Receptor Signaling	A2020A0141H
human蛋白质磷酸酶系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Protein Phosphatases	A2020A0142H
human维甲酸信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Retinoic Acid Signaling	A2020A0143H
human信号转导通路搜索系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Signal Transduction Pathway	A2020A0144H
human骨骼肌成肌肌病系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Skeletal Muscle: Myogenesis & Myopathy	A2020A0145H
human干细胞系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Stem Cell	A2020A0146H
human干细胞信号系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Stem Cell Signaling	A2020A0147H
human干细胞转录因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Stem Cell Transcription Factors	A2020A0148H
human应力及毒性途径搜索系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Stress & Toxicity Pathway	A2020A0149H
human突触可塑性系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Synaptic Plasticity	A2020A0150H
humanT细胞无能和免疫耐受系列PCR Array	PCR ARRAY of Human T Cell Anergy & Immune Tolerance	A2020A0151H
humanT辅助因子分化系列PCR Array	PCR ARRAY of Human T Helper Cell Differentiation	A2020A0152H
humanT细胞和B细胞激活系列PCR Array	PCR ARRAY of Human T-Cell & B-Cell Activation	A2020A0153H
human端粒与端粒酶系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Telomeres & Telomerase	A2020A0154H
human终末分化指标系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Terminal Differentiation Markers	A2020A0155H
human转化生长因子-β/骨形态发生蛋白信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human TGFb / BMP Signaling Pathway Human	A2020A0156H
human转化生长因子-β信号的目标系列PCR Array	PCR ARRAY of Human TGFb Signaling Targets	A2020A0157H
human辅助T细胞1和辅助T细胞2反应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Th1 & Th2 Responses	A2020A0158H
human辅助T细胞17细胞响应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Th17 Response	A2020A0159H
human紧密连接系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Tight Junctions	A2020A0160H
human肿瘤坏死因子信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human TNF Signaling Pathway	A2020A0161H
humanI型跨膜蛋白质受体信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Toll-Like Receptor Signaling Pathway	A2020A0162H
human转录因子系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Transcription Factors	A2020A0163H
human移植排斥系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Transplant Rejection	A2020A0164H
human肿瘤转移系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Tumor Metastasis	A2020A0165H
humanI型干扰素响应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Type I Interferon Response	A2020A0166H
human络氨酸激酶系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Tyrosine Kinases	A2020A0167H
human泛素连接酶系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Ubiquitin Ligases	A2020A0168H
human泛素（泛素）化途径系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Ubiquitination (Ubiquitinylation)	A2020A0169H
human折叠蛋白反应系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Unfolded Protein Response	A2020A0170H
human 血管内皮生长因子信号系列PCR Array	PCR ARRAY of Human VEGF Signaling	A2020A0171H
human细胞外因子信号通路系列PCR Array	PCR ARRAY of Human WNT Signaling Pathway	A2020A0172H
human细胞外因子信号目标系列PCR Array	PCR ARRAY of Human WNT Signaling Targets	A2020A0173H
human伤口愈合系列PCR Array	PCR ARRAY of Human Wound Healing	A2020A0174H

1. 任何一台能够做QPCR的仪器据能够做PCRarray吗？

回答：基本上任意一台的QPCR 仪器都可以进行QPCR array的实验。

BioTNT根据仪器采用的96孔或者384孔板，分为以下5种板型（plate format）：

plate format	Instrument provider	QPCR instrument model
A(384well)	lifetechnologies	7900，ViiA7(384 well block)
B(96 well)	lifetechnologies	7300,7500,7700,7900（standard 96well），ViiA7（standard 96well）
C(96 well)	lifetechnologies	7500(fast block)，7900HT（fast block），stepone plus，ViiA 7(Fast block)
D(96 well)	Biorad	iCycler，MyiQ, iQ5
E(96 well)	Biorad	CFX96，DNA Engine opticon，opticon 2，Chromo4

请您在订购时提供您使用的QPCR 仪器，我们也可以为您确定plate format；如果您的仪器不在以上清单上，也可以邮件咨询我们，我们会有专业的技术人员为您确定相应的plate format。

2. BioTNT PCR array的适用在哪里？

回答：适用现有的通路研究；

适用少样本或中等样本，多基因的QPCR 检测；

在低样本或中等样本的情况下，费用和时间远小于自行建立QPCR实验；

使用方便，操作简单，结果稳定性好；

3. BioTNT PCR array的优点是什么？

回答：灵敏度高，样本使用量低；

线性范围广，可同时检测表达水平差异大的基因；

每个基因的检测引物优化后保证高扩增率和产物单一；

重复性高，Ct值的平均差异只有0.25个循环；

覆盖范围广：目录产品包含通路分析、疾病研究；

定制产品可根据客户要求选择设置；
数据分析方便：专用软件方便数据统计与分析

4. 从QPCR 得到实验数据后，如何进行后续的结果分析？需要配套的仪器设备吗？

回答：您可以用这个链接，http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

点击分析工具，然后再点击：分析软件下载下载后进行分析。不需要特殊的分析仪器。

5. BioTNT 的PCR array，如果自己使用，需要购买哪些配套产品？

回答：您可以用这个链接，http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

点击相关产品；

建议除了您要使用的PCR array 产品之外，您应购买以下产品，对PCR array进行配套使用：

PCR array cDNA第一链合成试剂盒 A2010B0B03
Real time 染料PCR PreMIX A2010A0112
建议使用高品质的抽提试剂盒，推荐型号为：

Qiagen RNeasy Mini Kit (50) 74104
RNase-Free DNase Set (50)，79254

6. 如果使用其他公司的抽提试剂盒，如Trizol 法抽提试剂盒，能否使用BioTNT的PCR array产品？

回答：建议抽提时尽量使用高质量的样本，高质量的抽提试剂盒，并在抽提时进行DNA 去除；使用PCR array 产品前，先进行样本质量的验证。能够通过样本质量验证的样本，可以进行PCR array实验。

7. 如何进行PCR array 实验前的样本质量验证？

回答：为了保证PCR array实验的质量，建议在使用前先进行样本质量验证；

RNA 定量与质量控制

A. 使用无菌水(RNase-free)稀释 RNA 样本，检测 260 nm 和 280 nm 吸光值，A260/280 应大于 1.8。

B. 使用公式A260× 40 ×稀释倍数 = XXXXμg/mL 计算 RNA 浓度。

C. 使用琼脂糖凝胶电泳检测 RNA 完整性。

D. 建议：RNA 质量测定后，逆转录得到CDNA，建议用多个内参基因自行验证CDNA 质量；

推荐购买biotnt 的样本质量验证引物套装，可以在进行QPCR 之前对样本进行验证(包含内参引物，如human beta actin， GAPDH, 18sRNA等)

E. 基因组DNA污染控制

建议在进行PCR array 之前购买BioTNT 样本质量验证引物套装或者单独的GDC 引物进行基因组DNA 污染控制的质量验证；验证结果CT 值如果小于35，则表明存在可检测到的基因组DNA污染，应采取措施予以解决。

8. 如何进行样本的调平？

回答：进行PCR array之前，对样本需要进行调平。具体调平方式为：

1. RNA 含量调平：实验样本的RNA 尽量调到同一水平；加入RNA 酶free的水，调整RNA浓度；

2. 调平后的样本：通过内参引物进行验证，根据CT 值，进行二次调平。

9. BioTNT PCR array定制费用如何？

回答：目前BioTNT PCR array 提供您的定制，仅比预制产品增加了400元/板的定制费用。您可以把您要检测的指标给我们，然后把您的仪器型号，以及sample 数量，重复数量提供给我们，我们为您设置相应的PCR array 形式，并核算相应的费用给您。

BioTNT PCR array的定制，方式灵活，1 plate起订。

详细请参考：http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx，点击定制服务。

10. 如果我没有QPCR 仪器，BioTNT 能够提供什么服务？

回答：您可以选择BioTNT PCR array service。

详细请参考：http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx，点击service。