小鼠皮质醇酶联免疫试剂盒
用于小鼠体外定量诊断血清或血浆中的皮质醇
货号：A1010A0507 96 wells
仅供科研使用，勿用于药物、临床检测
联系地址：上海市徐汇区银都路398号1号楼5楼，邮编：200231
联系电话：86 21 51692391，4008801880
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1.检测原理：
皮质醇ELISA试剂盒是一种基于竞争结合原理的固相酶联免疫吸附测定(ELISA)。 微滴孔被单克隆抗体包裹，单克隆抗体指向皮质醇分子上的抗原位点。样品的内源性皮质醇与皮质醇-辣根过氧化物酶偶联物竞争结合到包被抗体上。孵育后，将未结合的共轭物洗去。结合过氧化物酶偶联物的量与样品中皮质醇的浓度成反比。加入底物溶液后，颜色的强度与样品中皮质醇的浓度成反比。
2.背景：
皮质醇，又称氢化可的松，是一种有机化合物，化学式为C21H30O5，是从肾上腺皮质中提取出的是对糖类代谢具有最强作用的肾上腺皮质激素，即属于糖皮质激素的一种。
3.试剂盒组份（2-8℃保存）
1. 酶标板（coated wells），96 test，12X8，可分拆, 已经包被抗皮质醇抗体的酶标板；
2. 标准品（standards）系列，7只标准品，标准品A 浓度0 ng/ml，1ml ；标准品B 浓度20ng/ml，1ml ；标准品C浓度50ng /ml，1ml；标准品D浓度100 ng /ml，1ml；标准品E浓度200 ng/ml，1ml；标准品F浓度400 ng/ml，1ml；标准品G浓度800 ng/ml，1ml；单位转换： 1ng/ml = 2.76 nmol/l
3. 酶联物（Enzyme Conjugate），25 mL，1 vial；
4. 40×浓缩洗涤液（Wash Buffer），30 mL，1 vial；
5. TMB 显色液，14mL，1 vial；
6. 终止液（Stop Solution），14 mL，1 vial；
4.未提供的试剂、仪器和耗材：
1. 校准的微量滴定板读数器（450 nm，参考波长为620 nm至630 nm）
2. 校准的可变精度微量移液管
3. 吸水纸
4. 计时器
5. 用于数据缩减的半对数图形纸或软件
6. 多道（8道或12道）移液器试剂存放槽；
7. EP管及试剂配置容器；
8. 圆柱形量筒：100mL，200mL，500mL和1L；
9. 洗瓶或自动洗板机；
10. 蒸馏水或去离子水；
11. 封板膜或板盖；
12. 乳胶手套；
5.注意事项：
1. 此试剂盒仅供体外诊断使用。仅供专业人士使用。
2. 本试剂盒中所有含有小鼠血清或血浆的试剂均已检测确认通过美国食品药品监督管理局批准的程序对HIV I/II、HBsAg和HCV呈阴性。然而，所有试剂都应在使用和处置中被视为潜在的生物危害。
3. 在开始化验之前，请完整仔细地阅读说明书。使用的有效版本随试剂盒提供的使用说明。确保所有内容都被理解。
4. 微孔板包含可折断的条带。未使用的井必须在2°C至8°C的温度下储存在密封箔袋中，并在提供的框架中使用。
5. 样品和试剂的移液必须尽快完成，并按照相同的顺序进行每一步。
6. 每次运行都必须建立一条校准器曲线。
7. 对照组（包含在试剂盒中）应包括在每一次运行中，并落在既定的置信度范围内。
8. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
9. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
10. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
11. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
12. 在储存和温育时避免强光直接照射。
13. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发出来的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反映试剂的生物活性。
14. 标准孔及待测样本均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线，请合理安排预实验。
15. 不能使用过期产品。
16. 不要使用严重溶血、严重脂血、贫血或储存不当的血清。
17. 任何含有叠氮或硫柳汞的样品或对照血清都不能与本试剂盒兼容，因为它们可能导致错误的结果。
18. 只有校准品A可用于稀释任何高血清样品。使用任何其他试剂都可能导致错误的结果。
19. 在经常接触动物或动物产品的病人中出现的嗜异性抗体有可能对免疫学试验造成干扰。因此，如果怀疑出现错误结果，临床诊断应包括病人背景的所有方面，包括接触动物/产品的频率。
20. 建议所有客户准备自己的对照材料或血清池，在每次运行中应包括高和低水平，以评估结果的可靠性。
21. 当规定使用水进行稀释或重组时，请使用去离子水或蒸馏水。
22. 为了减少对潜在有害物质的接触，在处理试剂盒试剂和小鼠标本时应戴上手套。
23. 所有试剂盒的试剂和标本在使用前应达到室温并轻轻地但彻底地混合。避免反复冷冻和解冻试剂和标本。
24. 当对照组的检测值不能反映既定范围时，可能表明程序技术不当，移液不准确，清洗不彻底以及试剂储存不当。
25. 读取微孔板时，微孔中存在的气泡会影响光学密度（ODs）。在进行读数步骤之前，要小心地去除任何气泡。
26. 底物溶液（TMB）对光敏感，如果保存得当，应保持无色。不稳定或污染可通过出现蓝色表示，在这种情况下不应使用。
27. 在分配基质和停顿溶液时，不要使用这些液体会接触到任何金属部件的移液器。
28. 为防止试剂污染，使用新的一次性移液器吸头来分装每个试剂、样品、标准品和对照品。
29. 不要在一次测试中混合不同批号的试剂盒成分，不要使用超过标签上所印的有效期的任何成分。
30. 试剂盒必须被视为危险废物，并按照国家规定进行处理。
6.安全性：
可能用于制备标准品和对照品的血清已经过测试，发现对乙肝表面抗原无反应，也已经过HCV和人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体的测试，发现是阴性的。然而，没有任何一种测试方法可以完全保证不存在HIV、HCV和B型肝炎病毒或任何传染源。试剂应被视为潜在的生物危险，并以适用于任何血液标本的相同预防措施进行处理。
7.化学危害
避免与含有TMB、过氧化氢和硫酸的试剂接触。如果接触到这些试剂中的任何一种，请用大量水清洗。TMB是一种可疑的致癌物。
8.样本的采集：
1. 样本：本试剂盒可检测血清，抗凝血浆（EDTA，肝素锂血浆）
注意：含有叠氮化钠的样品不应用于检测。
一般来说，应避免使用溶血性或脂血性标本。
血清：
通过静脉穿刺采集血液（如用血清采集管），使之凝固，并在室温下通过离心分离血清。在完全凝固之前不要进行离心分离。接受抗凝血剂治疗的捐赠者可能需要增加凝血时间。
抗凝血浆：
全血应收集到含有抗凝血剂的离心管中，收集后立即离心。
标本的储存和准备
标本应加盖，在检测前可在2°C至8°C下储存48小时。保存时间较长（一个月内）的标本在检测前应仅在- 20℃下冷冻一次。更长时间的样本请-60到-80度保存。
标本稀释
小鼠血清，抗凝血浆，初次检测，推荐不稀释；
如果在初次检测中，发现标本的含量超过了最高标准，可以用标准A稀释标本，并按照检测程序中的描述重新进行检测。
在计算浓度时，必须考虑到这个稀释系数。
举例：
a) 稀释1:10： 10微升样品+90微升标准A（充分混合）
b) 稀释1:100：10微升稀释液 a) 1:10 + 90微升标准A（充分混合）