CM 6FF琼脂糖树脂

CM 6 Fast Flow, Agarose Resin

产品描述

CM 6FF Ion Exchange Agarose Resin，是将羧甲基键合在6%交联琼脂糖凝胶微球上形成的带有弱酸阳离子基团的层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构，与生物活性大分子有很好的相容性，具有离子交换容量高，非特异性吸附少，流速快等特点，广泛用于蛋白质、核酸、多肽及多糖等的生物大分子实验室规模制备和生物制药、生物工程的工业化制备。

基础参数

产品信息

运输与保存方法

使用方法

1. 1. 装柱

1.1 根据分离目标性质配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。

1.2 将凝胶抽干，并用蒸馏水洗涤2次去除保存的乙醇，用初始缓冲液（按凝胶:缓冲液=3:1的比例）配成匀浆并脱气。

1.3 将层析柱垂直固定，底端用水或缓冲液润湿并保持一段液位。

1.4 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，使凝胶在柱内自由沉降。

1.5 连结好柱子顶端活动柱头，打开蠕动泵，让缓冲液用使用时操作流速流过5个柱体积，再使用1.5倍的操作流速流过5个柱体积，调节适配柱头，使其尽量贴近胶面，最后用2 - 3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。

注意：

1) 所有操作过程不能引入气泡，保证装胶的均匀度。

2) 如无条件做1.2，填料层有气泡，可进行2次装柱，去除保存的乙醇和气泡。

3) 乙醇等试剂配制的溶液需要脱气。

2. 平衡

将平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱，观察检测器的变化，直到电导、pH等参数不变。

3. 上样

切换转换阀进行上样，上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择，也可进行线性实验找到最佳上样量；样品的预处理：除盐，置换缓冲液，澄清过滤（0.45、0.22 μm）等。

4. 冲洗

用2 - 3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱，观察检测器的变化，直到电导、pH等参数不变，此时未交换的组分被清洗出去。

5. 洗脱

离子交换柱的洗脱可用恒定洗脱、梯度洗脱或者阶跃洗脱，一般推荐增大盐浓度的梯度洗脱进行。

6. 再生

用高盐浓度的缓冲液（含1 - 2mol/L NaCl）按操作流速冲洗3 - 5个柱体积，接着用平衡液洗到平衡3 - 5个柱体积。

若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

7. 在位清洗(CIP)

对于强结合蛋白质或脂类物质，可采用以下流程进行在位清洗：1 mol/L NaOH洗2个柱体积，8 mol/L尿素洗2个柱体积， 30%异丙醇洗2个柱体积，平衡缓冲液洗2个柱体积。

在位清洗可有效去除介质上的杂质，反向效果更佳。如需要去除内毒素热原，可以在50 cm/h速度下，1 mol/L NaOH清洗1 - 2h，再用无热原的1 M NaCl溶液置换(OH^-置换为Cl^-)。

注意事项

（1）本产品仅限科学研究使用，不得用于临床诊断和治疗等领域。

（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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