产品参数
Protein A 亲和琼脂糖树脂
Protein A, Agarose Resin
产品描述
Protein A Agarose Resin是BioTNT自主研发的以高刚性琼脂糖微球为基质，偶联耐碱性Protein A制备而成的抗体纯化介质。适用于单抗、双抗、多抗及含有Fc片段的重组蛋白类生物大分子的分离纯化。Protein A亲和层析介质具有机械强度高、反压低、化学稳定性好、耐碱性强等特点，即使在高流速下仍然能保持较高动态吸附载量，满足从实验室制备到中试及工业化生产的各种需求。
基础参数
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基质
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高刚性琼脂糖凝胶
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配基
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耐碱性Protein A
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填料粒径
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70 μm
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最大流速
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500 cm/h
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推荐流速
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50-300 cm/h
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pH稳定性
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pH 3-10工作，pH 2-12清洗
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耐反压
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0.3 MPa
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载量
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60mg人IgG/ml(2min保留时间)；70mg人IgG/ml(5min保留时间)
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产品信息
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产品名称
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货号
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规格
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Protein A Agarose Resin
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P-1010-01
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10 mL
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P-1010-02
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50 mL
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P-1010-03
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100 mL
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P-1010-04
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500 mL
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P-1010-05
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1000 mL
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运输与保存方法
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储存条件
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4-8 ℃、不可冻存
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运输条件
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冰袋运输
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使用方法
1.缓冲液准备
所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22或0.45 μm的微孔滤膜过滤。
平衡缓冲液： 20 mM PBS, 150 mM NaCl， pH=7.0；
洗脱缓冲液： 采用柠檬酸、醋酸或甘氨酸作为洗脱液，如（100 mM Gly， pH=3）；
针对不同的抗体，可以通过改变缓冲液的盐的类型、浓度还有 pH 来进?结合条件和清洗条件的优化。
2.色谱柱装填
（1）所有需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。
（2）在柱子下端加入蒸馏水，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的蒸馏水。
（3）将Protein A琼脂糖凝胶连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降。
（4）柱压不超过0.3MPa，如果装柱系统中无法测柱压，则正常流速下填装。
（5）填装好的Protein A琼脂糖凝胶柱用2-5个柱体积的初始缓冲溶液平衡，建议流速100cm/h，平衡后的柱子可以用于抗体蛋白的上样和洗脱纯化。
3. 样品纯化
1）平衡：使用之前用平衡缓冲液替换层析柱中20%乙醇保存液；依次用洗脱液和平衡液冲洗并平衡层析柱；
2）进样： 样品为抗体发酵液，按照 10% 流穿下的 DBC 0.8倍以下载量进样；样品停留时间?于5min；
3）淋洗：采用平衡液清洗 5CV； 必要时可以加入高盐或者稍低的pH清洗，将非特异性吸附的杂质尽可能多
的清洗下来；
4）洗脱：洗脱液清洗 5CV至基线平衡；
5）清洗：1 M 醋酸清洗 5 CV；
6）CIP：0.1 ~0.5 M NaOH 溶液，清洗 5 CV至基线平衡；
7）再平衡：采用平衡液清洗 5 CV 至基线平衡；
8）保存：使用结束后，先用纯水替换分析柱中缓冲盐，然后用20% 乙醇保存。
耐碱性测试
以0.5 M NaOH为清洗溶液对Protein A琼脂糖凝胶进行CIP，每次清洗体积为5CV，并在0，25，50，100，150，200次结束后对Protein A琼脂糖凝胶的DBC进行测试（保留时间2 min）。并与国产某产品进行对比。
压力流速测试
分别以不同柱子进行测试：（1）柱直径6.6 mm、柱床高度250 mm。（2）柱直径25 mm、柱床高度250 mm。
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产品名称
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货号
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规格
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Protein A AntF预装上机柱
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注意事项
（1）本产品仅限科学研究使用，不得用于临床诊断和治疗等领域。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。