1、实验目的
采用多指标流式联合分析技术对血清、血浆、细胞上清等不同样本中多个靶点的浓度进行定量联合分析。
2、实验原理
将不同待测物质的抗体分子共价交联到特定的编码微球上，每个编码微球对应一个对应的检测项目。 通过液相反应将不同待测物质的荧光编码微球混合，然后加入待测物质，生成的复合物与标记的荧光素发生反应。 在流动的鞘液的驱动下，微球以单排形式通过红色和绿色激光。 红色激光用于确定微球的荧光代码，绿色激光用于确定微球上报告分子的荧光强度。 从而达到快速准确定量检测的目的。
3、实验方法
操作步骤
准备标准品和试剂
↓
每孔加入 25μL 微球混悬液
每孔加入 25μL 各梯度标准品或测试样本
室温孵育1小时，然后磁力洗涤2次
加入 25μL 检测抗体溶液
室温孵育1小时，洗涤2次
添加 50μL 荧光素溶液
室温避光孵育30分钟，洗涤2次
加入 80μL 洗涤缓冲液
使用 NovaHT进行检测
靶点
线性
IL-4
8.23-6000pg/ml
G-CSF
13.72-10000pg/ml
IL-17
0.41-300pg/ml
IL-1β
1.37-1000pg/ml
IL-2
0.14-100pg/ml
IL-6
KC
IL-10
IL-12p70
0.69-500pg/ml
TNF-α
2.74-2000pg/ml
IFN-γ
20.58-15000pg/ml
IL-23p19
4.12-3000pg/ml
MCP-1
