一、简介：

MicroRNAs（miRNAs）是一种小的内源性非编码RNA分子，大约由21－25个核苷酸组成。这些小的miRNA通常靶向一个或者多个mRNA，通过翻译水平的抑制或断裂靶标mRNAs而调节基因的表达。成熟的microRNA 的形成包含多个步骤。首先，microRNA 基因被转录成命名为pri-microRNA 的初级转录物；动物pri-microRNA的第一次剪切位于细胞核内，产生大小为70个核苷酸左右并能形成茎-环结构的microRNA 前体，称为pre-microRNA；第二次剪切位于细胞质中，pre-microRNA被剪切成21-25个核苷酸成熟的microRNA。

 

MicroRNA 自从1993年首次被报道以来，现已经被发现了3000多种，存在于人类和所有的模式生物中。MicroRNA 通过与mRNA的3’ UTR 结合而介导翻译水平的调控，也可通过与mRNA结合的互补程度决定microRNA将以何种机制发生作用；完全的互补引起与RNAi类似的作用，不完全互补则导致翻译抑制作用。因此，研究microRNA对于深入探讨生命现象的本质，解释细胞行为和疾病发生机制，具有重要的理论意义；对于疾病的诊断、治疗和预防具有潜在的实际应用价值。

 

关于microRNA:

图１，pre-microRNA 和 microRNA 示意图

 

二、BioTNT  microRNA 检测试剂盒和microRNA茎环法QPCR引物试剂盒：

 MicroRNA由于长度太短，一般难以检测。BioTNT miRNA qPCR Detection System 是BioTNT 推出的专门用于miRNA 定量检测的系统。该系统包括：

        ·     Part A 部分：逆转录检测试剂盒；可用于miRNA的特异茎环逆转录系统（120tests）；可单独订购：miRNA cDNA第一链合成试剂盒  A2010B0B04   120T

·         Part B 部分：QPCR premix，可用于QPCR的premix； 可单独订购：Real time 染料PCR PreMIX   A2010A0112；

·         Part C 部分：microRNA茎环法QPCR引物试剂盒（包括特异性的茎环逆转录引物和qPCR检测上下游引物）；可单独订购：货号为：miRNA检测试剂盒货号-PC

 

订购的产品为：

human microRNA qRT-PCR Detection Kit；

mouse microRNA qRT-PCR Detection Kit；

rat microRNA qRT-PCR Detection Kit；

 

为了获得可靠的q-PCR数据, 内参基因被广泛应用，BioTNT公司具有多年的q-PCR实验和研究，根据表达稳定性(M)和配对变异分析(V), 并综合考虑经济因素和实验可行性,筛选和验证以下人类和鼠类中最优的microRNA 内参基因。

human microRNA 内参基因；

human microRNA 内参基因；

rat   microRNA 内参基因；

 

三、microRNA 内参基因试剂盒推荐：

为了获得可靠的q-PCR数据, 基因被广泛应用，BioTNT公司具有多年的q-PCR实验和研究，根据表达稳定性(M)和配对变异分析(V),并综合考虑经济因素和实验可行性,根据文献筛选和验证以下人类和鼠类中的microRNA 内参基因，并建立检测体系。

microRNA 内参基因的检测试剂盒见下表：

品名	ID	accession	特异性种属	序列
Rnu6B  microRNA rat 内参real time PCR 检测试剂盒	CL-rat Rnu6b	K00784	small RNA-rat	推荐使用
4.5s1 microRNA rat 内参real time PCR 检测试剂盒	CL-rat 4.5s1	AY228147	small RNA-rat	推荐使用
Rnu6B  microRNA mouse 内参real time PCR 检测试剂盒	CL-mouse Rnu6b	NR_003027	small RNA-mouse	推荐使用
snoRNA202 microRNA mouse 内参real time PCR 检测试剂盒	CL-mouse snoRNA202	NR_028128.1	small RNA-mouse	推荐使用
Rnu6B  microRNA human 内参real time PCR 检测试剂盒	CL-human Rnu6b	NR_002752.1	small RNA- human	推荐使用
RNU48 microRNA human 内参real time PCR 检测试剂盒	CL-human RNU48	NR_002745.1	small RNA-human	推荐使用

四、优惠促销和订购指南：

      BioTNT 目前推出买一送一活动，购买一个目的基因检测试剂盒，可赠送一个内参基因microRNA 茎环法QPCR引物试剂盒，可用于60个样本，茎环逆转录和正式QPCR 三重复实验的目的基因和内参基因的检测！

   如果您要检测两个microRNA 和一个内参microRNA, 您仅需增加订购一个microRNA 茎环法QPCR引物试剂盒，就可以完成40个样本的三重复检测。

   同理，您要检测三个microRNA 和一个内参microRNA, 您仅需增加订购两个microRNA 茎环法QPCR引物试剂盒，就可以完成30个样本的三重复检测。

 

BioTNT 推出更灵活的订购方式：

以下三个部分，可以根据您的实验情况，单独订购哦！

·      Part A 部分：逆转录检测试剂盒；可用于miRNA的特异茎环逆转录系统（120tests）；可单独订购：miRNA cDNA第一链合成试剂盒  A2010B0B04   120T

·         Part B 部分：QPCR premix，可用于QPCR的premix； 可单独订购：Real time 染料PCR PreMIX   A2010A0112；

·         Part C 部分：microRNA茎环法QPCR引物试剂盒（包括特异性的茎环逆转录引物和qPCR检测上下游引物）；可单独订购：货号为：miRNA检测试剂盒货号-PC

品名 货号 特性(如:特异性种属) 产品分类 品牌 规格 价格 总共 0 条记录　页次： 　当前第 1 页/共 0页 　　每页 25条 跳转到  页

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您也可以直接订购：

miRNA cDNA第一链合成试剂盒  A2010B0B04   120T

Real time 染料PCR PreMIX   A2010A0112       1.25ml(20ul*125T)

Real time 染料PCR MIX A2010A0112-3   1.25ml*10（20ul*1250T）

Real time 染料PCR MIX A2010A0112-2   1.25ml*4（20ul*500T）

    microRNA  QPCR kits

    进行microRNA的实验检测

      microRNA 抽提推荐 ：

    细胞或组织样本中总RNA 抽提（用于细胞量和组织量比较充足时）：
     RNA提取试剂盒(Trizol 法) A2010B0A02
     RNA提取试剂盒(Trizol 法) A2010B0A01
   细胞或组织样本中microRNA 抽提（用于细胞量少和微量组织的抽提）：
     RNeasy Micro Kit（50） 74004 
  石蜡样本中microRNA抽提：
     miRNeasy FFPE kit（50）217504 
   血清/血浆样本中microRNA抽提：
     miRNeasy Serum/Plasma Kit（50）217184 

   

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    _{关于microRNA：}

• 应用于miRNA的特异茎环逆转录系统、及其qPCR 反应特异miRNA的引物assay：
• 特异性的茎环逆转录引物和qPCR检测上下游引物。

      

特点：

• 1.   应用茎环逆转录引物进行逆转录，可以区分成熟的microRNA和premicroRNA；
  2.   应用BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit，已经优化的适合特异茎环逆转录引物进行CDNA 合成的protocol，用于100个microRNA样本的已知第一链CDNA合成；
  3.   BioTNT 经验证的特异性茎环系统assay 可以提供您方便的实验方案；采用了100Tests的包装，方便您的实验；
   
  产品特征：
  ² 本方法可以采用经典的trizol法抽提得到的总RNA；
  ² 检测的特异性：独特的miRNA茎环逆转录引物的设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-miRNA的污染；
  ² 检测分辨率高：该系统能分辨单碱基差异的miRNA；
  ² 一站式解决方案：BioTNT不仅提供检测的试剂盒，还提供经验证的人源、小鼠源、大鼠源的特异性microRNA assay；
  ² 检测灵敏度高：可在低至pg级的总RNA中检测到特异表达的miRNA；
   
  质量说明

• BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit已包含有检测所需要的所有试剂, 客户仅需要提供RNA及BioTNT 特异性茎环系统assay即可进行miRNA检测；
• 我们提供的BioTNT 特异性茎环系统assay建议同BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit配套使用；
• 我们承诺推出的每个BioTNT 特异性茎环系统assay都提供利用BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit进行验证的报告，其报告内容包括验证流程、引物相应扩增曲线、融解曲线、及其推荐的反应条件, 同时还提供阳性的cDNA验证模板，客户可以参考此条件进行检测实验。

 

 

 

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